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熒光光度法測定影響熒光強度的外部因素

熒光光度法測定影響熒光強度的外部因素

1)溫度 溫度降低,熒光效率和熒光強度升高。

2)溶劑 隨著溶劑的極性的增加,熒光物質的π→π* 躍遷幾率增加,熒光強度將增強,熒光波長也 發生紅移;溶劑粘度降低,熒光強度降低;溶 劑應達到足夠的純度。 化學工程與現代材料學院

3)pH值 ?具酸或堿性基團的熒光物質,在不同pH值時,其 結構可能發生變化,因而熒光強度將發生改變。 NH3+ OHH+ NH2 OHH+ NH- ?利用金屬離子與有機試劑生成配合物進行測定金 屬離子時,配合物的穩定性和組成受溶液pH值影 響較大,從而影響到它們的熒光性質。 Ga3++鄰-二羥基偶氮苯 Ga3++鄰-二羥基偶氮苯 化學工程與現代材料學院 pH 3~4 pH 6~7 1:1配合物(產生熒光) 1:2配合物(不產生熒光)

4)散射光 瑞利散射光(Rayleigh scattering light):光子與物 質分子發生彈性碰撞,不發生能量交換,運動方 向改變;λ瑞利光=λ入射光 拉曼散射光(Raman scattering light) :光子與物 質分子發生非彈性碰撞,發生能量交換,運動方 向改變;λ拉曼光≠λ入射光 消除方法:選擇適當的激發波長 化學工程與現代材料學院 448 320 a.強度 360 激發 320nm 硫酸奎寧 448 350 激發 350nm 硫酸奎寧 b.強度 320 激發 320nm 0.1mol/L硫酸 360 350 激發 350nm 0.1mol/L硫酸 400 硫酸奎寧在不同激發波長下的熒光

(a)與拉曼光譜(b) 化學工程與現代材料學院 在不同波長激發光下主要溶劑的拉曼光波長(nm) 溶劑 水 乙 醇 環己烷 CCl4 CHCl3 248 271 267 267 — — 激發光(nm) 313 365 405 350 416 469 344 409 459 344 408 458 320 375 418 346 410 461 436 511 500 499 450 502 化學工程與現代材料學院

5) 熒光熄滅 熒光熄滅(熒光猝滅):熒光物質分子與溶劑分 子或其他溶質分子的相互作用引起熒光強度降低 的現象稱為熒光熄滅。 熒光熄滅劑:能引起熒光熄滅的物質。 導致熒光熄滅的原因: ?碰撞猝滅 M+hv→M*,M*+Q → M+熱 ?靜態猝滅 M+Q → MQ 非熒光物質 ?轉入三重態的猝滅 三重態 ?熒光物質的自猝滅 熒光物質濃度較高 ?氧的熄滅作用 化學工程與現代材料學院 熒光熄滅法: 熒光物質加入某種熄滅劑后,其熒 光強度的減少與熒光熄滅劑的濃度呈線性關系, 可用于測定熄滅劑的含量,這種方法稱為熒光熄滅法。

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